UV-vis метки для NH2 и COOH (для ВЖХ)

[dan14444]

Коллеги, кто в водной среде цеплял поглощающие метки на амины или карбоксилы?

EDC просится для обоих, ангидрид типа фталового для СООН, кто чего посоветует из своего опыту?

[Upstream]

Всё зависит от того, что именно Вы хотите повесить на функцию, и подозреваю, что это что-то новенькое...
EDC из-за осложнений для аналитических целей не годится однозначно. Не стоит ходить по граблям. Есть хорошо охарактеризованные реагенты и подходы, которые уже где-то разложены по полочкам. Для начала поищите свежий обзор или книгу по ключевым словам "pre-column derivatization".

[dan14444]

EDC - единственное, что есть на полке прямо сейчас... .

На функцию мне абсолютно пофиг чего вешать, лишь бы поглощало ниже 200. На амины - фталевый ангидрид либо альдегид с меркаптаном - из очевидного, но их ещё дождаться надо... На карбоксилы пробовал Br-Mmc, работает, но хотелось бы лучше...

По обзорам - само собой, но интересен опыт из первых рук. Например, куча описаний по реакции "в петле" - хотелось бы знать, насколько оно хорошо в реальности?...

[dan14444]

Кстати о фталевом альдегиде... не могу найти... либо реактивный с трёхмесячной доставкой и конской ценой, либо как дезсредство от 100кг...

Кто-нить знает, где его быстро добыть пару грамм? При цене $39 за кг - меньше 100кг не продают, редиски...

[Polychemist]

Динитрофторбензол: viewtopic.php?f=24&t=98192

Код: Выделить всё

http://www.shop.fizlabpribor.com/product/0104/3258

[Polychemist]

... лишь бы поглощало ниже 200.

[dan14444]

ага, ДНФБ посмотрю, спасибо...

а "ниже" - в смысле, по энергии

[Zabolot]

А чё, этот, как его, FITC (фенилизотиоцианат), не подойдёт? В щелочной среде шьётся довольно бодро, правда отмывать потом надо. Ещё по моему TAIC можно, но он не на всякой полке лежит.

[Zabolot]

Ах,что я гоню, пардон, это совсем не в ту степь..

[StYV]

А что обязательно в водной среде? Это не простая затея, много чего делал, но как правило в безводной, хотя если посмотреть литературу то можно найти.
С уважением StYV.

[Deminolog]

Коллега, добрый день!
Порылся немного на сайте Сигмы, может что-то из этих списков подойдет?
Карбоксильные группы:
http://www.sigmaaldrich.com/analytical- ... =109583661
Аминогруппы (по аминам сразу FMOC в голову лезет, но в какой среде он работает - не помню! )
http://www.sigmaaldrich.com/analytical- ... e=20381884

[dan14444]

Изотиоцианаты кончно подойдут, ну и прочее с сайта Сигмы, верятно. Но где я - и где оно?
Пока пробую фталальдегид, спасибо поделившемуся Upstream.

P.S. Да, обязательно в водной. Более того, такие реакции делают прямо в петле. Вопрос только в том, получится ли последнее в флюидной схеме Acquity...

[Deminolog]

У Вас сейчас их SFLC система? Если да - то как впечатления?

[dan14444]

SFLC - это что? second flow? У меня обычные однонасосные, беспетельные... Кран для 2D, правда, заказан...

[Deminolog]

Пардон, SFC-системы... Я уж думал, что получится поспрашивать насчет их относительно новой системы:
http://www.waters.com/waters/en_US/Supe ... d=10145739
Говорят, никакая колонка долго не выдерживает такие условия, что, отчасти, вполне понятно, другое дело интересно, так ли она хороша, как о ней поют фирмачи?

[dan14444]

Хех, не, таких извр... пардон, инноваций у меня пока нет.

P.S. Фтальальдегид работает, чешу репу как на Acquity соорудить реакцию в отсутствующей петле...

[Upstream]

>А что обязательно в водной среде? Это не простая затея, много чего делал, но как правило в безводной, хотя если посмотреть литературу то можно найти.
Эх, коллега StYV, это для настоящих химиков "это не простая затея", а для "пограничников", начиная уже с био-химиков, и, особенно, для нано-химиков - нет ничего проще! Берут, к примеру, 100 экв. Fmoc-Cl, окучивают им смесь аминокислот в боратном буфере (9+) с ацетоном (1:1) , через 10 минут экстрагируют всё это гексаном и водную фазу напрямую анализируют ВЭЖХ. Неизменно хороший результат ©, а что 99% реагента - коту под хвост, всем пофигу. В этом примере хоть результат адекватный, а вот когда водорастворимый карбодиимид, в чуть меньших избытках, используется на манер супер-клея для пришивки чего угодно с карбоксилом к чему угодно с аминогруппой... Причём процесс никак не контролируется, а условия, зачастую, пришивку эту исключают... Это уже сказочный дурдом! Но "оно" (продукт на выходе) работает, более-менее, и все счастливы.

[Polychemist]

Ага, ацилирование амина в водно-спиртовой среде действием УА - легко и нацело.

[StYV]

Забыл упомянуть что объектами анализа были кровь и моча больных.
С уважением StYV..