Перегруз колонки

[Duomo]

Доброго времени суток. может кто подскажет как правильно рассчитать максимальное количество соединение для посадки на колонку? Что бы, конечно, не убить колонку. в паспорте не указанно, данная ценнейшая информация.
спасибо заранее всем за дельные советы)))

[avor]

Колонка перегрузкой не убивается по определению. Вот если у вас смола и нерастворимые фракции(но тогда убиение от нагрузки не зависит) тады - ой (или они образуются в процессе разделения. Вот тут надо учитывать степень концентрирования аналита на колонке(если таковая имеется), если она превысит при какой-то нагрузке растворимость аналита, вот это и будет порогом нагрузки), или сорбция необратимая(но в этом случае она убивается при любой нагрузке, только если эта нагрузка маленькая, то это происходит постепенно).

Максимальная нагрузка это статическая емкость сорбента помноженная на объем сорбента.

[Сержл]

Размер колонки? Тип?

[StYV]

Все зависит от конкретной ситуации.
Обычно примерно для колонок (длина 25 см) 10 мм - 100 мг, 25 мм - 1 г, 40 мм - 10 г по веществу (суммарное количество). По объёму считают из хроматограммы. Для пика вещества определяют объём на уровне базовой линии и берут четверть от него. При этом считается, что эффективность падает не более чем на 10%.
Также надо учитывать растворимость в подвижной фазе, особенно при работе с обращенкой - может быть резкий скачок давления вплоть до отключения насоса при превышении максимально заданного давления в системе.
С уважением StYV.

[Любитель_Манниха]

Также надо учитывать растворимость в подвижной фазе, особенно при работе с обращенкой - может быть резкий скачок давления вплоть до отключения насоса при превышении максимально заданного давления в системе.

Или до выбивания нафиг капилляров Но возможен вариант работы с маленьким потоком, если, например, то, что не нужно, смывается до 70% MeCN/ 30% H2O, а целевое только при 95% MeCN.

[StYV]

При работе на обычном хроматографе (максимальное давление 400 атм) ни разу такого не видел, а вот при упаковке колонок пару раз наблюдал старт колонки в потолок - незабываемые впечатления!
С уважением StYV.

[Alinochka]

Перегруз в плане пики не деляться? или когда колонка вообще не работает????

Все зависит:
от колонки (кто производитель, фаза, размер частиц...) Есть ли предколонка?
от аналита - свойств вещества, в чем вы его вводите? в воде, буфере или метаноле? может ли выпасть какая то соль на сорбент?
можно ввести и 3 мкл а можно и 20...
от Вашых рук....(случайно выставили не тот поток и пошло давление на колонку...хоть приборы и отключаються при избыточном давлении - колонки от этого лутше не становяться...у нас так колонка просела )

Можете почитать книгу Садек "Как избежать ошибок в ВЕЖХ" (если Вы интересовались ВЕЖХ)