Молочко

[Dimpler]

Народ! Плиз хелп! Кто знает как быстро можно отделить эмульсию жиров от белковой фракции в молоке? Срочняк надо.
Заранее спасибо.

[Dimpler]

Э-э-э я имел ввиду не "как быстро" в смысле времени, а как это сделать быстро...

[Nice Guy]

спроси у Ивановой

[Dimpler]

Хорошая шутка... 5 баллов.
Может кто-нить по-существу что-нибудь выскажет?

[vooodoo]

буду банален как никогда,
а растворитель нельзя поварьировать?
а высалить белки?
а элементарная денатурация (сквашивание к примеру)?

[Enzyme]

Высадить ацетоном и центрифугнуть при 14000. Жиры по идее в супернатанте должны остаться. Хотя точно не знаю

[Dimpler]

Спасибо за советы.

А вот можно скоагулировать жиры, чтобы они всплыли, а белки остались в растворе? Это было бы оптимально...

А если допустим высадить белки, к примеру, ацетоном, то потом они растворятся опять, если их в воду жахнуть или в буфер какой-нибудь?

[Dimpler]

Пробовал высаживать ацетоном, трихлоруксусной и муравьиной кислотами. После центрифугрования и декантирования не получается целиком осадок растворить. Вот такая фигня, товарищи. Мне нужно потом форез ставить => нужен раствор белков. Может кто-нбудь хотя бы подскажет где это посмотреть можно?

[vooodoo]

А практикумы по биохии не пробовал смотреть? там навернео должно быть... (зайди на molbiol.ru)
...или вот чего у меня есть Proteomics in Practive но тока не знаю есть ли там описание про именно молоко т.к. книга направлена на мембранные белки (или клеточные?)

[Dimpler]

На molbiol.ru есть тока стандартные методики типа высаливание сульфатом аммония, осаждение ТХУ. Это не прокатило.

А ты можешь посмотреть в твоей адской книжке, если тебя не затруднит? Или давай сконнектимся как-нибудь...

[Enzyme]

Пробовал высаживать ацетоном, трихлоруксусной и муравьиной кислотами. После центрифугрования и декантирования не получается целиком осадок растворить. Вот такая фигня, товарищи. Мне нужно потом форез ставить => нужен раствор белков. Может кто-нбудь хотя бы подскажет где это посмотреть можно?

Ну, все бывает - подденатурировал слегка. Во-первых, перед нанесением на форез тебе его все равно кипятить с loading buffer - попробуй, мож растворится. Если нет - раствори сколько сможешь, потом открути минут пять на 5000-6000 об/мин, и супернатант на форез. Скорее всего хватит за глаза. Тебе дальше вестерн делать или просто покрасить белОчки?

[Dimpler]

БелОчки красить будем. Но, я так думаю, что полос там ни хрена не получится, а будет окрашено всё. Белков-то там разных дофига, но попробую. Спасибо за совет, Enzyme

[Enzyme]

БелОчки красить будем. Но, я так думаю, что полос там ни хрена не получится, а будет окрашено всё

Снизить концентрацию. Тут - то тебе и сыграет на руку что не весь белок ресуспендировался

[vooodoo]

Млин
Чесна лломает копаться в книжке т.к. она немаленькая, а в протеин-анализе я хреново разбираюсь.
Давай на мыло скину 10 мегов весит

[Dimpler]

Скинь, плз, на dimpler@mail.ru

[vooodoo]

Слухай сюды
Почтовик мой глючит,
и трафик жалко он сейчас у меня платный сорри
так что на ссылочку

http://www.prettybio.com/pub/A%20Guide% ... lation.rar

и еще

http://www.prettybio.com/pub/Molecular%20Analysis.rar

и еще

http://www.prettybio.com/pub/The%20Prot ... ndbook.rar

вай а по моему ту книгу Proteomics in Practice удалили
так что прямой контакт, ты мне компакт (RW или R) а я те запишу не жалко

[Dimpler]

Спасибо.

[avor]

Народ! Плиз хелп! Кто знает как быстро можно отделить эмульсию жиров от белковой фракции в молоке? Срочняк надо.
Заранее спасибо.

А типа сепарацию не пробовали снижаете температуру до +1 гр поС и центрифугируете или пользуетесь фермерским(бытовым) сепаратором непрерывного действия.

Короче :
- Сливки делаете?
- Э-а, дерьмо СЛИВаем.

[Dimpler]

- Сливки делаете?
- Э-а, дерьмо СЛИВаем.

=)
Спасибо, уже не актуально...