Нужна помощь в синтезе олига с меткой "Су 5"

[BTI]

Добрый день!

Имеется синтезатор ДНК (ABS), синтезируем праймеры фосфорамидитным способом. Есть "Анализатор ДНК", который работает только с флуоресцентной меткой "Су 5".
Хочу попробовать "пришить" эту метку к олигам. В наличии есть метка "Су 5" в виде "Су 5 amidite" (Amersham Biosciences) и "Cy 5 dCTP" (Amersham Biosciences)
Помогите с методикой "пришивки" и последующей очистки.

Заранее благодарна.

[avor]

У вас 3 варианта на выбор.
1)При синтезе олига добавляете еще одну букву в конце, но эта буква будет Су 5 amidite
Вот ссылка
http://www.gelifesciences.com/aptrix/up ... Leads6.pdf
2) Уже с обычным синтезированным и снятым почищенным олигом проводите реакцию с Cy 5 dCTP и терминальной дезоксинуклеотидил трансферазой протокол вот здесь:
http://www.sileks.com/main/descr/zip/Biozond.zip
При этом насколько я понял пометятся разные концы олига
3) вариант сделать и первое и второе, тогда пометятся два разных конца олига

[BTI]

avor, огромное спасибо! Спасли жизнь человеку

[гаер*]

Если вдруг окажется, что выход целевых олигов невелик (особенно через амидит), то можете попробовать прогрессивную технологию:

Код: Выделить всё

http://www.biodye.ru/oligo_kits

[BTI]

Спасибо за совет, гаер*

Этот вариант мы тоже рассматриваем. И скорее всего будем "метить" праймеры Вашим способом.