

Перед исследованием отдельных проб необходимо обеспечить однородность состава образцов. Сокращенные пробы растворяются в ацетонитриле для дальнего УФ (Scharlau), образуя раствор с отношением веса к объему 0.1% (10 мг на 10 мл). УФ- видимая область спектра измеряется с помощью спектрофотометра в кварцевой кювете длиной 1 см. (с откалиброванной кюветой, содержащей ацетонитрил для использования в дальнем УФ, на условном пути) а спектральная поглощательная способность измеряется для видимых волн длиной 400, 500 и 600 нм.
Сокращенные пробы (прибл. 20 мг) растворяются в во внутреннем стандартном растворителе в соотношении 1.0 мг/мл. Один мл. раствора помещается трубу C18 Isolut (IST) (объем слоя в хроматографической колонне 500 мг) в соотношении 3 Х 1 мл с 9: 1 MeCN/H2О. Элюцирование с 3 Х 1 мл MeCN и трубкой быстро высыхает.
Связанные элюаты фильтруются для ВЭЖХ через фильтры из политетрафторэтилена 0.45 микрон (Biolab).
Пробы (впрыскивания 20 µI) анализируются в ВЭЖХ- колонке Merck Lichrospherе 100 RP-18 с одним фланцем (5 µI) с защитной колонкой Мerck Lichrospherе 100 RP-18 4-4. Подвижная фаза составляет 75% MeCN/25% H2О, оба содержат 0.1% TFA с текучестью 1.5 мл/мин и температурой колонок 40°С. Детектирование с 210 нм.
Метод калиброван с использованием тотарола (чистый при 1Н-ЯMР и ВЭЖХ), полученного от IRL. Была получена линейная характеристика (R2 от 0.999) над калиброванными образцами, ранжированными от 0.125 до 1.0 мг/мл.
+ говорят ли: наружный вид раствора? Индивидуальное содержание примесей?
Подскажите, плжалуйста, хоть что-нибудь. Заранее благодарю
