методика выделения аминокислоты на катионите

[Lyol'ka]

Значит, не будем хранить в ОН-форме. Спасибо.

Правильно ли я понимаю, все манипуляции со смолой следует проводить с использованием деионизованной воды, простой дистиллят на стадии отмывки в этом случае не подойдет?
Подскажите из личного опыта, при какой скорости лучше проводить промывку, нанесение образца и элюирование? И есть ли такой закон: чем медленнее, тем лучше, т.е. эффективнее?
Еще вот что заинтересовала: известно, что при различной ионной силе раствора и в разных растворителях, объем смолы значительно отличается - при каком состоянии смолы определять объем колонки?

[Lyol'ka]

По поводу трех анионов. Дело обстоит так: первый выходит в свободном объеме вместе в солями - он мне не нужен. Второй задерживается на колонке и снимается уксусной кислотой. Третий остается на колонке (он тоже не нужен) и надеюсь выходит при регенерации или во время промывки солянкой, поскольку, как я понимаю, хлорид ион снимает с колонки все ацетаты.

[SkydiVAR]

По поводу трех анионов. Дело обстоит так: первый выходит в свободном объеме вместе в солями - он мне не нужен. Второй задерживается на колонке и снимается уксусной кислотой. Третий остается на колонке (он тоже не нужен) и надеюсь выходит при регенерации или во время промывки солянкой, поскольку, как я понимаю, хлорид ион снимает с колонки все ацетаты.

Из этого делаем вывод - первый компонент менее кислый, чем второй и третий и менее кислый, чем уксусная кислота и не вытесняет ацетат-ион со смолы, второй - сравним с уксусом по кислотности, а третий - более кислый и удерживается смолой при промывке уксусом. Тогда всё проще - наносите смесь, промываете водой до нейтральной реакции (важно!) и смываете первый компонент, потом отмываете уксусом целевой продукт, потом промываете солянкой и смываете третий компонент.

Правильно ли я понимаю, все манипуляции со смолой следует проводить с использованием деионизованной воды, простой дистиллят на стадии отмывки в этом случае не подойдет?

Для ионообменников лучше использовать деионизированную воду - если Вы не желаете иметь в продукте посторонние ионы.

Подскажите из личного опыта, при какой скорости лучше проводить промывку, нанесение образца и элюирование? И есть ли такой закон: чем медленнее, тем лучше, т.е. эффективнее?

В общем случае - чем ниже скорость элюента, тем ближе система к равновесной и тем эффективнее идет разделение. У Вас это учитывать не обязательно, на мой взгляд. Я элюировал "самотеком", столб элюента над смолой - 20-30 см.

Еще вот что заинтересовала: известно, что при различной ионной силе раствора и в разных растворителях, объем смолы значительно отличается - при каком состоянии смолы определять объем колонки?

На мой взгляд - не важно, разница в объеме процентов 5-10. Методологически - как в прописи указано. Если берут 100 мл в Cl^--форме на миллиэквивалент анионов - так и следует брать/считать именно на хлоридную форму.

[chemist]

Правильно ли я понимаю, все манипуляции со смолой следует проводить с использованием деионизованной воды, простой дистиллят на стадии отмывки в этом случае не подойдет?

Конечно, т.к. дистиллированная вода содержит СО2.

Подскажите из личного опыта, при какой скорости лучше проводить промывку, нанесение образца и элюирование? И есть ли такой закон: чем медленнее, тем лучше, т.е. эффективнее?

Имнно так приходится поступать, если кинетика сорбции-десорбции неизвестна. Время ограничивается просто разумными пределами.

Еще вот что заинтересовала: известно, что при различной ионной силе раствора и в разных растворителях, объем смолы значительно отличается - при каком состоянии смолы определять объем колонки?

При том, которое будет использовано в разделении.

По поводу трех анионов. Дело обстоит так: первый выходит в свободном объеме вместе в солями - он мне не нужен. Второй задерживается на колонке и снимается уксусной кислотой. Третий остается на колонке (он тоже не нужен) и надеюсь выходит при регенерации или во время промывки солянкой, поскольку, как я понимаю, хлорид ион снимает с колонки все ацетаты.

Так оно часто и бывает, но это только теоретически всё должно идти как по маслу . На практике вымывание предшествующего иона проходит не полностью, а если на него давить, начинает вымываться последующий и выходят смеси, более или менее обогащённые . К тому же, вся эта картина не повторяется в разных экспериментах, отличающихся друг от друга как бы незначительно. Особенно свистопляска начинается при масштабировании, изменении соотношения диаметр/высота колонки, использовании/неиспользовании обратного тока и т.д.

[Lyol'ka]

Спасибо за ценные, а главное практически значимые советы.

[Natalie_L]

Да уж, и в самом деле - ступил... Отмываться - никак. Упарить и снова на катионит.
Ну, по крайней мере я поступил бы именно так и не стал бы развлекаться с отмывкой бутанолом и прочими весьма интересными и экзотичными способами отмыть аминокислоту от NH₄Cl.

Либо сделать гидрохлорид аминокислоты и несколько раз с солянкой упарить досуха, хлорид аммония разлагается при нагревании, процентов до 2-3 так довести можно.

[chemist]

Либо сделать гидрохлорид аминокислоты и несколько раз с солянкой упарить досуха, хлорид аммония разлагается при нагревании, процентов до 2-3 так довести можно.

Интересный способ . Впервые слышу, чтобы так можно было удалить хлористый аммоний с температурой возгонки 338 градусов Цельсия...

[Natalie_L]

Дожать на "масле" при нагреве... мы так частично убирали.
Еще если гидрохлорид вещества растворим в изопропаноле, то профильтровать раствор. Хлорид аммония в изопропаноле растворим плохо. Но полностью от него избавиться можно в данном случае только на катионите, да.

[chemist]

Дожать на "масле" при нагреве... мы так частично убирали.

На масле продукту может не понравится, возьмёт, да и разложится

[Любитель_Манниха]

несколько раз с солянкой упарить досуха, хлорид аммония разлагается при нагревании, процентов до 2-3 так довести можно.

Впервые слышу, чтобы так можно было удалить хлористый аммоний с температурой возгонки 338 градусов Цельсия...

Не знаю, в каком количестве, но при кипячении реакционной массы в толуоле (в моём случае гидрохлорид амина переводится в основание прямо водным аммиаком и греется с Дином-Старком) тоже какая-то часть NH4Cl улетает.

[chemist]

Не знаю, в каком количестве, но при кипячении реакционной массы в толуоле (в моём случае гидрохлорид амина переводится в основание прямо водным аммиаком и греется с Дином-Старком) тоже какая-то часть NH4Cl улетает.

Незначительная часть возгоняется всегда, но избавится от него т.о. до остаточного содержания в несколько % . У меня как-то в реакции образовывался NH4HCO3, вот этот летит, так летит, весь обратный холодильник был забит, приходилось останавливать и вымывать