Колоночная хроматография нежных веществ

[Phili]

Приветствую, коллеги!
Передо мною встала задача почистить на колонке амидофосфит. В процессе работы следует избегать контакта с влагой воздухом, поэтому требуется колонить под аргоном или азотом, использовать сухие растворители. Подскажите пожалуйста как технически проводится такая колоночная хроматография: как добавляете элюэнт, собираете фракции, удаляете элюэнт и так далее. Может кто-то встречал описание в литературе?
Заранее спасибо за помощь!

[Cherep]

самое тяжёлое будет держать собранные фракции под аргоном.
прямо хоть помещай колонку в glaw box

[SkydiVAR]

glaw

glove

[Cherep]

)))

[Ra]

Быть может элюент подтягивать слабым вакуумом и перед сменой фракций впускать в них сухой аргон, или собирать фракции в трехгорлую колбу, с последующим передавливанием фракций аргоном.

[Phili]

Спасибо всем за советы! Мне тут пришла такая идея относительно сбора фракций. Готовим набор пробирок, закрытых септами и заполненных инертом. От колонки проводим тонкий пластмассовый капилляр в один и из септов (плюс в эту же септу вставляем иглу для уравновешивания давления в пробирке), по мере наполнения пробирок эта септа с капилляром будет перемещаться к новой, пустой пробирке, а уже заполненная пробирка закрывается непроколотой септой. Примерно так! Само собой, колонка продавливается сверху инертом.

[Ra]

Еще вспомнил такой вариант, когда была рутинная хроматография для удобства собирал фракции в воронку с компенсатором, а из нее сразу в колбу для концентрирования.

[Serty]

... В процессе работы следует избегать контакта с влагой воздухом, поэтому требуется колонить под аргоном или азотом, использовать сухие растворители. ...

Вообще то силикагель содержит 20-30% воды(не помню точно), а без нее деление идет очень погано, особенно для полярных веществ. Вы уверены, что ваши продукты не будут реагировать со связанной водой?

[Phili]

вода конечно не очень там нужна, но выбора нет, надо пробовать! Иногда такие вещества выдерживают наличие воды, главное чтобы среда не была кислая (добавка ТЭА к элюенту).

[Serty]

Возможно это даже существеннее сухости, добавка основания. У нас были такие проблемы с dmTr-защищенными соединениями, без амина частично валились.

[зыркало1]

Когда-то пыталась очистить на колонке с окисью алюминия кислотной отмывки соединения трехвалентного фосфора и прошло диспропорционирование...

[palek]

Приветствую, коллеги!
Передо мною встала задача почистить на колонке амидофосфит. В процессе работы следует избегать контакта с влагой воздухом, поэтому требуется колонить под аргоном или азотом, использовать сухие растворители.

Уточните, пожалуйста, что такое амидофосфит. Это вот такое: -О-Р(-О-)-N<? И от чего чистите?

[palek]

Возможно это даже существеннее сухости, добавка основания. У нас были такие проблемы с dmTr-защищенными соединениями, без амина частично валились.

Что можно проверить, применительно к обсуждаемым веществам, сравнив ТСХ в системе в присутствие основания и без.

[Phili]

Приветствую, коллеги!
Передо мною встала задача почистить на колонке амидофосфит. В процессе работы следует избегать контакта с влагой воздухом, поэтому требуется колонить под аргоном или азотом, использовать сухие растворители.

Уточните, пожалуйста, что такое амидофосфит. Это вот такое: -О-Р(-О-)-N<? И от чего чистите?

Точно, так и есть, это соединение трехвалентного фосфора с двумя P-OR связями и одной P-NR1 связью.
Чистить предполагается от исходного хлорофосфита, то есть вместо одной NR1 будет P-Cl.

[palek]

Приветствую, коллеги!
Передо мною встала задача почистить на колонке амидофосфит. В процессе работы следует избегать контакта с влагой воздухом, поэтому требуется колонить под аргоном или азотом, использовать сухие растворители.

Уточните, пожалуйста, что такое амидофосфит. Это вот такое: -О-Р(-О-)-N<? И от чего чистите?

Точно, так и есть, это соединение трехвалентного фосфора с двумя P-OR связями и одной P-NR1 связью.
Чистить предполагается от исходного хлорофосфита, то есть вместо одной NR1 будет P-Cl.

Эта группировка широко используется в фосфорамидитном методе химического синтеза олигонуклеотидов. Классические фосфорамидиты - вполне устойчивы в воде, но разлагаются кислотой. Так что попробуйте ваши вещества на ТСХ с триэтиламином в системе - они вполне могут оказаться живучими.

[гаер*]

соединение трехвалентного фосфора с двумя P-OR связями и одной P-NR1 связью.
Чистить предполагается от исходного хлорофосфита, то есть вместо одной NR1 будет P-Cl.

Прямо так и грУзите на колонку, не отмыв непрореагировавший хлорид бикарбонатом? Загляните ещё раз в методику, что ли.

Чем бокс городить, высушите лучше раствор вещества перед упариванием и растворители для хроматографии. Ну и и не жалейте триэтиламина - иногда его нужно до 20%. И колонку набивайте с добавлением триэтиламина.

[Любитель_Манниха]

Чем бокс городить, высушите лучше раствор вещества перед упариванием и растворители для хроматографии.

Если боится кислорода в-во, растворители перед применением дегазировать

[Serty]

...Точно, так и есть, это соединение трехвалентного фосфора с двумя P-OR связями и одной P-NR1 связью.
Чистить предполагается от исходного хлорофосфита, то есть вместо одной NR1 будет P-Cl.

Ваша примесь должна быть еще более чуствительна к воде, возможно короткой колонки(почти фильтрация) в основной системе вам хватит - примесь либо развалится давая сильно удерживаемую кислоту, либо ковалентно сядет на силикагель. Кстати, что-то мне эти соединения кажутся знакомыми... не их ли используют при синтезе ДНК. Если их, то там методики должны быть отполированы до предела

[Phili]

соединение трехвалентного фосфора с двумя P-OR связями и одной P-NR1 связью.
Чистить предполагается от исходного хлорофосфита, то есть вместо одной NR1 будет P-Cl.

Прямо так и грУзите на колонку, не отмыв непрореагировавший хлорид бикарбонатом? Загляните ещё раз в методику, что ли.

Ну почему же сразу гружу, хлорид связан в триэтиламмоний хлориде, который перед колонкой может быть легко удален фильтрацией.Так что здесь сложности никакой нет.

[гаер*]

хлорид связан в триэтиламмоний хлориде

как это?