Забитая колонна HPLC

как правильно провести химический эксперимент?
Ответить
Аватара пользователя
Phobos
Сообщения: 4816
Зарегистрирован: Чт авг 12, 2004 9:24 am

Забитая колонна HPLC

Сообщение Phobos » Пн июн 18, 2018 4:49 pm

Есть намертво забитая колонка reverse phase 4.6х25 мм, подозрение у меня, что в свое время впустили большой процент ацетатного водного буфера в ТГФ или ацетонитрил, выпали соли и намертво блокировали ее. Попытки пропустить хоть какой растворитель даже на слабом потоке дают мгновенное повышение давления и насос вырубается.
Если просто кинуть колонку в мензурку с дист. водой - есть шанс, что она как-то просочится внутрь чисто за счет капилларных эффектов?
Попытаться подключить к вакууму и прососать через нее 50% метанол? как-то интуитивно боязно.
У кого какие идеи/опыт?
Wodka trinkt man pur und kalt, das macht hundert Jahre alt!

Аватара пользователя
amik
Сообщения: 23090
Зарегистрирован: Вс мар 05, 2006 9:32 pm

Re: Забитая колонна HPLC

Сообщение amik » Пн июн 18, 2018 5:12 pm

Коллега Phobos, для профессиональных вопросов в общехимическом разделе давно создан подраздел техника химического эксперимента / techniques, давайте всё-таки туда. А здесь оставим простор для для всего остального.
Бог на стороне не больших батальонов, а тех, кто лучше стреляет (приписывается Вольтеру)

Аватара пользователя
Phobos
Сообщения: 4816
Зарегистрирован: Чт авг 12, 2004 9:24 am

Re: Забитая колонна HPLC

Сообщение Phobos » Пн июн 18, 2018 8:13 pm

ОК, хотя как-то и экспериментом данное деяние трудно назвать...некая разновидность юзефул фак :)
Wodka trinkt man pur und kalt, das macht hundert Jahre alt!

Nickolas
Сообщения: 591
Зарегистрирован: Пн авг 27, 2007 8:15 pm

Re: Забитая колонна HPLC

Сообщение Nickolas » Пн июн 18, 2018 8:32 pm

А что за "слабый поток"? Совсем ничего не проходит даже при скорости 0,2 мл в минуту?

Аватара пользователя
Phobos
Сообщения: 4816
Зарегистрирован: Чт авг 12, 2004 9:24 am

Re: Забитая колонна HPLC

Сообщение Phobos » Пн июн 18, 2018 8:45 pm

Ага. Начинает мгновенно расти давление, и или на 400 выключается насос, или течи появляются во всех соединениях.
Wodka trinkt man pur und kalt, das macht hundert Jahre alt!

Cherep
Сообщения: 22533
Зарегистрирован: Чт окт 30, 2003 9:22 am

Re: Забитая колонна HPLC

Сообщение Cherep » Пн июн 18, 2018 9:17 pm

задом напрёд попробуйте прикрутить и помыть

Nickolas
Сообщения: 591
Зарегистрирован: Пн авг 27, 2007 8:15 pm

Re: Забитая колонна HPLC

Сообщение Nickolas » Пн июн 18, 2018 9:29 pm

Кстати, да. У меня была препаративная колона, которая была тоже забита, а задом наперед вполне работала.. Пришлось так ее и юзать, так как отмыть не получилось - давление все равно было слишком высоким. До сих пор используем и все норм.

Можно попробовать подержать ее в 5%-ном ацетонитриле, если там действительно соли.. А от всяких смол хорошо работает муравьиная кислота.

Аватара пользователя
Phobos
Сообщения: 4816
Зарегистрирован: Чт авг 12, 2004 9:24 am

Re: Забитая колонна HPLC

Сообщение Phobos » Пн июн 18, 2018 10:19 pm

Вот, кстати, про задом наперед есть вопрос. Слышал, что после промывки задом наперед (если удалась) все равно уже нельзя разворачивать колонну в нормальном направлении (именно нельзя, а не из-за давления избыточного). Почему?
А муравьинка силоксановые связи не рвет?
Wodka trinkt man pur und kalt, das macht hundert Jahre alt!

StYV
Сообщения: 2441
Зарегистрирован: Пн окт 24, 2005 11:43 pm

Re: Забитая колонна HPLC

Сообщение StYV » Пн июн 18, 2018 11:06 pm

Привет коллега!
Есть большая вероятность что забит фрит во входном фиттинге колонки. Аккуратно отвинтить фиттинг, вытащить фрит, промыть последовательно в воде, метаноле на ультрасонике.
Если не поможет, то все намного хуже.
Можно помыть сзади.
После этого тест на эффективность, колите стандарт (он указывается для колонки в бумагах к ней), считаете число тарелок и видите как оно изменилось. Процентов на 25, простые задачи можно решать. Если хуже, то мои сожаления. Только металл не выкидывайте - колонку можно перепаковать, это если умеете.
Как правило забиваются в колонках фриты, как передние так и задние (это уже чудо). Если выпала соль в теле колонки то это ведет к изменению ее структуры и соответственно к падению эффективности. Промывкой она не восстанавливается. И учтите, если при вскрытии переднего фиттинга видите что слой сорбента вверху просел, то все - колонка ек.
Мыть муравьиновой кислотой, это что-то.
Для обращенки как стандарт для анализа пептидов 0.1% ТФУ. И ничего работают люди, конечно срок то работы поменьше чем без нее. Вопрос вообще туманный, все зависит от конкретных условий, а литературы по устойчивости силоксановых связей просто дофига.
С уважением StYV.

Аватара пользователя
Phobos
Сообщения: 4816
Зарегистрирован: Чт авг 12, 2004 9:24 am

Re: Забитая колонна HPLC

Сообщение Phobos » Вт июн 19, 2018 6:50 am

У нас стоит precolumn картридж (не знаю, как это по-русски), и он остался незабитым. Пробка образовалась где-то в самой колонне.
Wodka trinkt man pur und kalt, das macht hundert Jahre alt!

StYV
Сообщения: 2441
Зарегистрирован: Пн окт 24, 2005 11:43 pm

Re: Забитая колонна HPLC

Сообщение StYV » Ср июн 20, 2018 11:07 am

Привет коллега!
Называется предколонка. Сочувствую, похоже о колонке надо забыть. В России такая стоит около штуки баксов, в начале 80-х около 300. Выгодное дело делать сорбенты и паковать колонки.
С уважением StYV.

Ответить

Вернуться в «техника химического эксперимента / techniques»

Кто сейчас на конференции

Сейчас этот форум просматривают: нет зарегистрированных пользователей и 2 гостя