Забитая колонна HPLC
Забитая колонна HPLC
Есть намертво забитая колонка reverse phase 4.6х25 мм, подозрение у меня, что в свое время впустили большой процент ацетатного водного буфера в ТГФ или ацетонитрил, выпали соли и намертво блокировали ее. Попытки пропустить хоть какой растворитель даже на слабом потоке дают мгновенное повышение давления и насос вырубается.
Если просто кинуть колонку в мензурку с дист. водой - есть шанс, что она как-то просочится внутрь чисто за счет капилларных эффектов?
Попытаться подключить к вакууму и прососать через нее 50% метанол? как-то интуитивно боязно.
У кого какие идеи/опыт?
Если просто кинуть колонку в мензурку с дист. водой - есть шанс, что она как-то просочится внутрь чисто за счет капилларных эффектов?
Попытаться подключить к вакууму и прососать через нее 50% метанол? как-то интуитивно боязно.
У кого какие идеи/опыт?
Wodka trinkt man pur und kalt, das macht hundert Jahre alt!
Re: Забитая колонна HPLC
Коллега Phobos, для профессиональных вопросов в общехимическом разделе давно создан подраздел техника химического эксперимента / techniques, давайте всё-таки туда. А здесь оставим простор для для всего остального.
Бог на стороне не больших батальонов, а тех, кто лучше стреляет (приписывается Вольтеру)
Re: Забитая колонна HPLC
ОК, хотя как-то и экспериментом данное деяние трудно назвать...некая разновидность юзефул фак
Wodka trinkt man pur und kalt, das macht hundert Jahre alt!
Re: Забитая колонна HPLC
А что за "слабый поток"? Совсем ничего не проходит даже при скорости 0,2 мл в минуту?
Re: Забитая колонна HPLC
Ага. Начинает мгновенно расти давление, и или на 400 выключается насос, или течи появляются во всех соединениях.
Wodka trinkt man pur und kalt, das macht hundert Jahre alt!
Re: Забитая колонна HPLC
задом напрёд попробуйте прикрутить и помыть
Re: Забитая колонна HPLC
Кстати, да. У меня была препаративная колона, которая была тоже забита, а задом наперед вполне работала.. Пришлось так ее и юзать, так как отмыть не получилось - давление все равно было слишком высоким. До сих пор используем и все норм.
Можно попробовать подержать ее в 5%-ном ацетонитриле, если там действительно соли.. А от всяких смол хорошо работает муравьиная кислота.
Можно попробовать подержать ее в 5%-ном ацетонитриле, если там действительно соли.. А от всяких смол хорошо работает муравьиная кислота.
Re: Забитая колонна HPLC
Вот, кстати, про задом наперед есть вопрос. Слышал, что после промывки задом наперед (если удалась) все равно уже нельзя разворачивать колонну в нормальном направлении (именно нельзя, а не из-за давления избыточного). Почему?
А муравьинка силоксановые связи не рвет?
А муравьинка силоксановые связи не рвет?
Wodka trinkt man pur und kalt, das macht hundert Jahre alt!
Re: Забитая колонна HPLC
Привет коллега!
Есть большая вероятность что забит фрит во входном фиттинге колонки. Аккуратно отвинтить фиттинг, вытащить фрит, промыть последовательно в воде, метаноле на ультрасонике.
Если не поможет, то все намного хуже.
Можно помыть сзади.
После этого тест на эффективность, колите стандарт (он указывается для колонки в бумагах к ней), считаете число тарелок и видите как оно изменилось. Процентов на 25, простые задачи можно решать. Если хуже, то мои сожаления. Только металл не выкидывайте - колонку можно перепаковать, это если умеете.
Как правило забиваются в колонках фриты, как передние так и задние (это уже чудо). Если выпала соль в теле колонки то это ведет к изменению ее структуры и соответственно к падению эффективности. Промывкой она не восстанавливается. И учтите, если при вскрытии переднего фиттинга видите что слой сорбента вверху просел, то все - колонка ек.
Мыть муравьиновой кислотой, это что-то.
Для обращенки как стандарт для анализа пептидов 0.1% ТФУ. И ничего работают люди, конечно срок то работы поменьше чем без нее. Вопрос вообще туманный, все зависит от конкретных условий, а литературы по устойчивости силоксановых связей просто дофига.
С уважением StYV.
Есть большая вероятность что забит фрит во входном фиттинге колонки. Аккуратно отвинтить фиттинг, вытащить фрит, промыть последовательно в воде, метаноле на ультрасонике.
Если не поможет, то все намного хуже.
Можно помыть сзади.
После этого тест на эффективность, колите стандарт (он указывается для колонки в бумагах к ней), считаете число тарелок и видите как оно изменилось. Процентов на 25, простые задачи можно решать. Если хуже, то мои сожаления. Только металл не выкидывайте - колонку можно перепаковать, это если умеете.
Как правило забиваются в колонках фриты, как передние так и задние (это уже чудо). Если выпала соль в теле колонки то это ведет к изменению ее структуры и соответственно к падению эффективности. Промывкой она не восстанавливается. И учтите, если при вскрытии переднего фиттинга видите что слой сорбента вверху просел, то все - колонка ек.
Мыть муравьиновой кислотой, это что-то.
Для обращенки как стандарт для анализа пептидов 0.1% ТФУ. И ничего работают люди, конечно срок то работы поменьше чем без нее. Вопрос вообще туманный, все зависит от конкретных условий, а литературы по устойчивости силоксановых связей просто дофига.
С уважением StYV.
Re: Забитая колонна HPLC
У нас стоит precolumn картридж (не знаю, как это по-русски), и он остался незабитым. Пробка образовалась где-то в самой колонне.
Wodka trinkt man pur und kalt, das macht hundert Jahre alt!
Re: Забитая колонна HPLC
Привет коллега!
Называется предколонка. Сочувствую, похоже о колонке надо забыть. В России такая стоит около штуки баксов, в начале 80-х около 300. Выгодное дело делать сорбенты и паковать колонки.
С уважением StYV.
Называется предколонка. Сочувствую, похоже о колонке надо забыть. В России такая стоит около штуки баксов, в начале 80-х около 300. Выгодное дело делать сорбенты и паковать колонки.
С уважением StYV.
Кто сейчас на конференции
Сейчас этот форум просматривают: нет зарегистрированных пользователей и 27 гостей