Наконец-то выделили некоторые финансы, продолжаю вопросы
Первое - какой стандарт выбрать - аптечный альбумин человеческий, или реактивный альбумин бычий?
Последний дешевле, но растворимость в воде меньше (пишут, что 2%).
Вот процедура из оригинальной статьи, стало быть, можно работать по ней, осадив
белки трихлоруксусной кислотой и промыв... чем? Той же ТХУ, более разбавленной?
Желательно ли выпадающий после добавления ТХУ осадок центрифугировать?
10 тыс g мне недоступно...
Код: Выделить всё
Standard BCA reagent and protocol.
Reagent A consists of an aqueous solution of 1%
BCA-Na2, 2% Na2C03 - HZO, 0.16% Naz tartrate, 0.4% NaOH, and 0.95% NaHC03. If
needed, appropriate addition of NaOH (50%) or solid NaHC03 is made to reagent A to ad-
just the pH to 11.25. Reagent B consists of 4% CuS04 - 5H20 in deionized water. Reagents A
and B are stable indefinitely at room temperature and are commercially available (Pierce).
Standard Working Reagent (S-WR) is prepared weekly or as needed by mixing 100 vol
of Reagent A with 2 vol of Reagent B. S-WR is apple green in color.
The standard assay procedure consists of mixing 1 vol of sample (standard or unknown)
with 20 vol of S-WR in a test tube.
Color development proceeds immediately, even at room temperature, but it can be greatly ac-
celerated by incubating the tubes in a constant temperature water bath. In this respect, the
temperature chosen for the color development is directly related to the desired sensitivity.
After the chosen incubation step, the samples are cooled to room temperature and their absorbances measured at 562 nm versus a reagent blank. The concentration of unknowns can be then determined from a
plot of concentration vs absorbances obtained for the standard protein solutions.
Я лично правами человека накушалась досыта. Некогда и мы,и ЦРУ,и США использовали эту идею как таран для уничтожения коммунистического режима и развала СССР. Эта идея отслужила свое,и хватит врать про права человека и про правозащитников. © Новодворская