Липидная фракция сыворотки крови (флуоресценция)
Липидная фракция сыворотки крови (флуоресценция)
Здравствуйте уважаемые участники форума!
Хотелось бы узнать Ваше мнение по следующему вопросу:
я делал липидные экстракты из сыворотки крови крыс по методу Фолча (образцы сывороток смешивались со смесью хлороформ:метанол (2:1), потом эти смеси центрифугировались (для расслоения), нижний слой (хлороформный) концентрировался в вакууме, полученный липидный экстракт растворялся в 100% метаноле). Затем измерялась флуоресценция фракции липидов в метаноле (возбуждение - 360 нм, эмиссия - 430 нм). Вообще делал это с целью определить т.н. Шиффовы основания липидов (продукты взаимодействия всяких альдегидов, образующихся при окислительной деструкции ненасыщенных жирных кислот, с аминогруппами сфинголипидов). Это, насколько могу судить, получилось.
Но заинтересовал другой вопрос: а что там, в этой липидной фракции, флуоресцирует на 500 нм (при возбуждении на 360 нм)?
На графике самый нижний спектр (А1) - это "чистый" 100% метанол.
Хотелось бы узнать Ваше мнение по следующему вопросу:
я делал липидные экстракты из сыворотки крови крыс по методу Фолча (образцы сывороток смешивались со смесью хлороформ:метанол (2:1), потом эти смеси центрифугировались (для расслоения), нижний слой (хлороформный) концентрировался в вакууме, полученный липидный экстракт растворялся в 100% метаноле). Затем измерялась флуоресценция фракции липидов в метаноле (возбуждение - 360 нм, эмиссия - 430 нм). Вообще делал это с целью определить т.н. Шиффовы основания липидов (продукты взаимодействия всяких альдегидов, образующихся при окислительной деструкции ненасыщенных жирных кислот, с аминогруппами сфинголипидов). Это, насколько могу судить, получилось.
Но заинтересовал другой вопрос: а что там, в этой липидной фракции, флуоресцирует на 500 нм (при возбуждении на 360 нм)?
На графике самый нижний спектр (А1) - это "чистый" 100% метанол.
У вас нет необходимых прав для просмотра вложений в этом сообщении.
Re: Липидная фракция сыворотки крови (флуоресценция)
жёлчные пигменты?
Не красота спасёт мир, а транквилизаторы.
Re: Липидная фракция сыворотки крови (флуоресценция)
Самое простое объяснение - это спектр одного того же соединения. Можно разделить экстракт на ТСХ, экстрагировать пятна и посмотреть спектры флуоресценции разных пятен.
Re: Липидная фракция сыворотки крови (флуоресценция)
нет, конечно желчные пигменты (билирубин, биливердин, уробилин, стеркобилин и их дериваты) и внеэритроцитарный гемоглобин нормальные компоненты плазмы.
Не красота спасёт мир, а транквилизаторы.
Re: Липидная фракция сыворотки крови (флуоресценция)
Судя по этому спектру возбуждения
Вызвать флуоресценцию билирубина возбуждением на 360нм весьма затруднительно.
разве что предположить, что это FRET
Вызвать флуоресценцию билирубина возбуждением на 360нм весьма затруднительно.
разве что предположить, что это FRET
Re: Липидная фракция сыворотки крови (флуоресценция)
ну во-первых это гипотеза, а во-вторых про билирубин речи нет. охота поискать, ищите по bile pigments
Не красота спасёт мир, а транквилизаторы.
Re: Липидная фракция сыворотки крови (флуоресценция)
жёлчные пигменты?
Интересные соображения, спасибо!Самое простое объяснение - это спектр одного того же соединения. Можно разделить экстракт на ТСХ, экстрагировать пятна и посмотреть спектры флуоресценции разных пятен.
Это не критика, а мои собственные предположения:
в плазме/сыворотке крови билирубин почти полностью связан с альбумином, поэтому вряд-ли он мог в сколь-нибудь значимых количествах перейти в липидную фракцию. Ну, может быть, не связанный перешёл и флуоресцирует. Хотя, опять же, свободный (не связанный с альбумином) билирубин имеет очень слабую флуоресценцию.
Спектры флуоресценции всяких порфиринов имеют два характерных пика флуоресценции (600-650 нм и второй в ещё более длинноволновой области)...
С печенью у этих крыс было всё порядке (это были обычные, не экспериментальные животные).
Re: Липидная фракция сыворотки крови (флуоресценция)
уперлось вам в билирубин, других пигментов масса и их дериватов
У вас нет необходимых прав для просмотра вложений в этом сообщении.
Не красота спасёт мир, а транквилизаторы.
Кто сейчас на конференции
Сейчас этот форум просматривают: нет зарегистрированных пользователей и 17 гостей